
酵母單雜交技術應用于驗證轉錄因子與基因上游順式作用元件是否有作用關系;也可以通過已知的基因上游的順式作用元件,通過酵母單雜交文庫篩選目標基因上游的反式作用因子,助力于功能基因的研究。


酵母單雜交技術是研究蛋白與DNA相互作用的一種分子生物學實驗技術。以酵母的遺傳為背景,研究真核生物反式作用因子與DNA互作的一種實驗技術。該技術是Prey蛋白與GAL4的激活結構域 (AD)融合,把特定的目的基因順式作用元件與基本啟動子或微小啟動子(mini promoter,Pmin)連接,與下游報告基因結合;當Prey蛋白與目的基因順式作用元件結合時,激活Pmin轉錄,并啟動報告基因表達。根據(jù)報告基因的表達情況,就可以反應反式作用因子與基因上游順式作用元件是否有作用關系。

客戶提交實驗材料詳細信息(候選蛋白序列、順式調控元件DNA序列等)—客戶提交信息確認—構建誘餌菌株以及候選蛋白表達載體—誘餌菌株自激活檢測及酵母轉化—互作篩選及稀釋點種驗證—數(shù)據(jù)采集及處理并撰寫提交實驗報告。

(1)提供元件與報告基因和候選蛋白與AD融合的酵母表達載體序列信息;
(2)篩選培養(yǎng)后的圖片采集和處理信息;
(3)詳細的酵母單雜交實驗步驟。